淺談減少E2定量elisa 試劑盒實驗誤差的小竅門
點擊次數(shù)：726次 更新時間：2020-07-17
E2定量elisa 試劑盒是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。下文來講講elisa試劑盒在使用時的安全事項。
使用E2定量elisa 試劑盒的安全事項：
1、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2、應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
3、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
4、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7、洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
8、底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
9、加入elisa試劑盒的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
10、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
在日常的E2定量elisa 試劑盒實驗操作中，難免會遇到一些誤差，這些誤差有偶然誤差、過失誤差、系統(tǒng)誤差，而一個小小的誤差主意能夠影響到實驗，那么怎樣才能縮小實驗誤差呢？下面主要就簡單介紹一下吧。
1、檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結和分析問題的能力，對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。
2、使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
3、評估試劑的實用性，試劑的穩(wěn)定與否，對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗，判定試劑符合要求后方可使用。
4、仔細閱讀說明書，嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方，反復試驗確定成立后才能改進。
5、洗滌*，如若洗板不*，酶結合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能出現(xiàn)假陽性。
6、嚴控反應時間，反應時間過長，酶失活；反應時間過短，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合，生成物結構松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。
7、注意試劑盒保存期，過保存期的試劑不能使用。
8、加樣要準確、快速。如果加樣不準確，酶生成物的量不能確定，直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關，所以加樣應慎重。要求在一定時間內(nèi)加樣完畢的實驗，如果加樣遲緩，便出現(xiàn)誤差，而且試劑長時間暴露在外，E2定量elisa 試劑盒尤其室溫過高時，保存期會縮短甚至失效。
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